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《黑夜彩虹》是吴启华、蔡少芬继《妙手仁心》的第二部情侣戏。剧中更有黎姿友情加盟，《黑夜彩虹》第一天，男主角吴启华因在内地拍剧未返，要一对女主角蔡少芬和黎姿支撑大局。结果黎姿以导弹身材撑爆紧身套装，该剧中黎姿也是首次尝试做女强人，黎姿自己表示，好在她现在没有拍拖，不怕会吓死男朋友。
乐天生（吴启华）是富豪柴荣智（高雄）的私生子，因生母不想拆散智的大好家庭，遂将此事隐瞒，一走了之。谁知生母早逝，生自少追随舅父贤（黎彼得）过着颠沛流离的生活，年幼的他早已明白要自力更生。他更深信知识才可改变命运，凭着坚...
第1集 常喜为一宗交通意外做证人，指证肇事客货车司机乐天生，上庭前天生好友Kiki率众至，质疑常喜患深近视看不清当日情况，差点被控恐吓证人。鉴证结果与证人口供对天生极为不利，不料伤者竟突然苏醒并说出真相，天生终获撤销控罪，更向常喜示威。 天生接大学取录信，为终能完成亡母心愿，激动不已。天生首天上课，竟发现与常喜为同学。天生因迟到及为救舅父乐贤欠贵利数而中途离座，惹欧教授不满。天生救出乐贤及其子乐一丁后，三人回想多年来因乐贤欠赌债而被逼「潜水」的日子，感触良多。天生无奈承担二人债务，工作加上夜校课程，令天生体力透支。 一日，欧教授发现天生说谎，拒绝让他补测验，乐贤与一丁竟为他「报仇」，欧教授误会天生所为，要控告他刑事毁坏。天生怒斥「大小不良」，二人竟劝他放弃学业，行走江湖，恰巧被欧教授听见一切，决定给天生一次机会，天生感激。常喜代姐照顾其初生女儿，却因一时疏忽，险令女婴窒息，常喜惊惶下恰巧截停天生的客货车送姨甥女入院，女婴终告无恙，但其父母却在赶往医院途中，交通失事身亡。
第2集 六年后，天生小学同学康正代表世茂集团到大学招聘员工，天生上前聚旧，康正即邀请他加盟。常喜为了照顾亡姐女儿常蕾，无奈放弃学业，更出卖劳力做多份兼职。天生终毕业，与乐贤及一丁到影楼拍照留念。常喜租住新居，不料搬屋之日业主突然变卦，常喜带着常蕾狼狈地四处寻觅居所，碰巧被乐贤及一丁遇到，二人为了取租金做私帮生意，竟将天生房间租给常喜，还要她预缴一年租金。 天生首天上班，乐贤以不能迟到为由骗他一早出门，一丁更充当司机送他上班，二人却在茶餐厅与一女子发生误会。天生发现早上开罪的女子竟是上司林艾美，咋舌。天生被分配负责管理车队，不悦。天生上任即发现车队问题重重，告知艾美，艾美竟冷漠地要他自己解决问题。天生回家得悉乐贤将其房间租给常喜，大发雷霆，欲赶她离开，常喜即表示要他双倍赔偿一年租金，气煞天生。天生要货车司机们跟规矩行事，惹众不满，但亦达到目标，天生向艾美展示成绩，艾美却不置可否。销售部主管兼公司老臣子裴谦于会议上指摘物流部漏单，艾美与天生据理力争，惹怒裴谦。
第3集 裴谦与众老臣子以辞职逼大老板柴荣智表态支持他们还是物流部，及后更得势不饶人，逼天生辞职，天生愤然离席，艾美即以辞职力保天生，荣智尴尬，急忙安抚两派。艾美到荣智每周三到的海边餐厅找他，让荣智了解自己刻意让公司问题暴露，以及起用天生的用意。常喜绝不放过赚钱机会，知道乐贤渴望吃住家饭，即承接包众人伙食。乐贤与一丁走私，怂恿常喜入局，天生见三人对答暧昧，恐常喜被骗，劝她不要信任乐贤，常喜不以为然。 裴谦有意为难天生，放工时间才加单，天生惟有通宵出新更表给货车司机。货仓一批手机不翼而飞，艾美着天生查单，天生却因乐贤与一丁走私被捕赶返大陆保释二人，回来才知事态严重，艾美大发雷霆，决定赔钱了事。艾美体会要将出货入货电脑化的逼切性，遂着物流部众人将货仓全面盘点。 乐贤与一丁因走私不成欠下巨债，常蕾惨变人质，常喜救女心切，花掉积蓄将常蕾救回。天生因放一名司机事假，无奈替更，而将盘点货仓一事放下，艾美不问情由下狂责天生，天生愤然辞职，艾美后来才知错怪好人。天生回家即被常喜追讨乐贤的欠债，天生懒理离家，常喜苦缠到底，为逼他还钱，竟然跳海，天生无奈答允还钱，及后才知常喜竟是游泳高手，气极。
第4集 荣智闻天生辞职消息，将天生辞职信收起。Kiki向来对天生有意，发现常喜住进乐家，醋意大发，在乐家大吵大闹，常喜亦不甘示弱，还着她替天生还债。荣智亲自邀天生出海，说出自己的奋斗史，天生明白创立世茂不易，加上人情难却，就正如自己难于割舍与乐贤的恩怨一样，亦知道艾美并非针对自己，决不计前嫌，重返世茂。物流部经多月来努力，终全面以电子条码处理出入货，却惹裴谦等老臣子不满。 常喜带常蕾到公园玩乐，却又诸多限制，天生看不过眼，上前嘲讽一番。天生看见Kiki新手机，得知是一丁偷偷将走私货送给她，心念一转，回公司查单，果然有所发现。Kiki与一丁替天生往出货的贸易公司搜集证据，不料上址已变成住宅，当天生与康正感茫无头绪时，竟发现该单位户主正是公司会计主管。 天生为摆脱Kiki黐缠，藉带常蕾出外游玩，将她吓跑，却被正在街上派传单的常喜，见到常蕾抱着毛公仔，吓得飞奔上前，与天生当街骂战，常蕾突感不适，常喜即抱她往医院，天生至此方知她一直用心良苦。天生与康正终查出贸易公司持有人与公司老臣子关系，联袂艾美一起，将众人罪行告知荣智，并主张报警处理，荣智不允。天生明白荣智立场，遂跟艾美及康正唱反调，气坏二人。
第5集 天生向康正及艾美表示即使不将裴谦等老臣子绳之于法，仍可等候时机将他们撵走，三人雄心勃勃伺机改革世茂。天生送常喜往医院，常喜发现当日的阔绰车主正是天生，对他渐渐改观。裴谦与荣智妻明心洁原为表兄妹，其子裴子辉留学毕业返港，即带他见心洁，希望为他入世茂铺路。心洁却深明大义，未为所动。天生为常蕾健康着想，在家中订定新规矩，常喜笑指天生过分紧张，实内心感激，遂买贵价海鲜做伙食。 世茂电脑主机被骇客入侵，物流部几近瘫痪，裴谦乘机落井下石，更荐举子辉加入世茂监管物流部，艾美一反常态表示欢迎，实希望此举能引蛇出洞。艾美向餐厅经理打听荣智的习惯及往事，相信他曾在这里有过一段难忘的情。子辉送鲜花给公司各女同事，刚巧艾美生日，收到一大花束，以为是他所送，目的是要令自己按他方式处事，不允，子辉却反唇相讥，幸康正及时现身，指花束乃自己所送，子辉无瘾离去。 艾美感激康正替自己解围，但对他爱意却不置可否。艾美刻意令荣智错认自己是其旧爱侣，坦承当年情。常喜误会天生向常蕾打听其父消息，愤然指斥，后才知错怪了他。艾美无意中得知裴谦等订房开会，天生遂请常喜相助摆放针孔摄录机，令常喜因而受伤。